정상 구강각화세포와 구강암세포 YD-38에서 microRNA 분석

Abstract

miRNA는 21-25개 염기의 작은 noncoding RNA 분자이며, 주로 표적 유전자의 3’-UTR 결합부위에 상보적인 염기서열을 가지면서 그 표적유전자의 단백합성을 억제시키거나 촉진시킨다. 또한 miRNA는 진핵세포 내에서 다양한 유전자를 조절함으로써 세포분화, 성장 및 증식 등 대부분의 생명현상에 관여하며, 특히 악성종양에서 특이적인 발현양상을 보여 종양유전자 혹은 종양억제자로서 발암과정에 다양하게 관여한다. 본 연구에서는 정상 구강세포와 구강암세포에서 miRNA들의 발현을 비교․분석하여 구강암 특이 miRNA를 확립하기 위해, 정상 사람 구강각화세포 NHOK와 한국인에서 유래한 구강암세포주 YD-38에서 세포배양, miRNA 추출, miRNA microarray 분석, 정량 PCR 분석, vector 제작 및 세포성장 억제실험을 시행하였다. NHOK와 YD-38 세포에서 microarray 분석으로 총 1,769개의 miRNA를 비교․분석한 결과, YD-38에서 40개의 miRNA가 발현이 증가하였으며 31개의 miRNA가 발현이 감소하였다. 특이적으로 10배 이상 발현이 증가한 miRNA는 miR-30a, miR-1246, miR-720 및 miR-934이었으며, 10배 이상 감소한 miRNA는 miR-203, miR-125a, miR-132, miR-UL70-3p 및 miR-1228이었다. 정량 PCR 결과, miR-30a는 YD-38에서 그 발현이 약 74배 증가하였으며 miR-1246은 약 53배 증가하였다. miR-203은 YD-38에서 그 발현이 약 8배 감소하였고 miR-125a는 약 3배 감소하였다. YD-38 세포에서 miR-203과 miR-125a는 세포의 성장을 뚜렷이 억제시켰다. 본 연구의 결과로서 miR-203과 miR-125a는 사람 구강암세포 YD-38에서 정상 사람 구강각화세포에서보다 그 발현이 크게 감소하였고, YD-38 세포의 성장을 뚜렷이 억제시킴을 알 수 있었으며, 본 연구의 결과로 이들 miRNA를 이용한 구강암 세포 성장억제에 관한 하나의 방향을 제시할 수 있을 것으로 생각된다.