Streptomyces sp. CS326 균주가 생산하는 지질분해효소의 정제 및 특성 분석.
- Author(s)
- 박다정
- Issued Date
- 2011
- Abstract
- In an attempt to isolate a biocatalyst able to catalyze biodiesel production from microbial source, Streptomyces sp. CS326 was screened from hundreds of soil isolates collected from various parts of Korea. In 16S rRNA sequence analysis, the strain showed high degree of similarity with Streptomyces xanthocidicus(99.79%), therefore it is classified as Streptomyces sp. CS326. An extracellular lipase produced by the strain(LP326) was purified using a single step gel permeation chromatography on Sepharose CL-6B. Molecular weight of LP326 was estimated to be 17kDa by SDS-PAGE. The activity was optimum at 40°C and pH7.0, and was stable at pH5.0-8.0 and below 50°C. It preferred p-nitrophenyl palmitate(C16), along chain substrate; and Km and Vmax for the substrate were determined to be 0.24mM and 4.6mM/min mg, respectively. First N-terminal amino acid sequences were APDLVALQSE, which are different from so far reported lipases. LP326 catalyzed biodiesel production using methanol and various oils; therefore, the enzyme can be applicable in the field of bio-fuel.
- Alternative Title
- Purification and Biochemical Characteristics of Lipase from Streptomyces sp. CS326
- Alternative Author(s)
- Park Da Jeong
- Affiliation
- 조선대학교 대학원 약학과
- Department
- 일반대학원 약학과
- Advisor
- 유진철
- Awarded Date
- 2012-02
- Table Of Contents
- Contents
List of tables
List of figures
ABSTRACT
Ⅰ. 서론 1
Ⅱ. 재료 및 방법 7
1. 시약 7
2. 지질분해효소를 생산하는 토양방선균의 분리 및 동 정 7
1) 지질분해효소를 생산하는 토양 방선균의 분리 7
3. 지질분해효소를 생산하는 Streptomyces sp. CS326 균주의 최적 배양 조건 8
4. 지질분해효소의 정제 8
1) 균주배양 및 지질분해효소 정제용 효소시액 준비 8
2) 황산암모늄(Ammonium sulfate) 분획 8
3) Sepharose CL-6B 컬럼 크로마토그래피 9
4) 겔 전기영동 9
5) N-말단 아미노산 염기 서열 분석 9
5. 지질분해효소 활성 측정 9
1) 지질분해효소 활성 측정 방법 9
6. 단백질 정량 11
7. 지질분해효소의 특성 11
1) 최적 지질분해효소 활성도와 안정성에 대한 온도의 영 향 11
2) 지질분해효소 활성도와 안정성에 대한 pH의 영향 11
3) 지질분해효소 활성도에 대한 금속이온과 조절인자에 대 한 영향 12
4) 지질분해효소 활성도에 대한 유기용매와 계면활성제의 영향 12
5) 단백질의 겔 전기영동 13
6) 위치특이성(Positional specificity) 13
7) 기질특이성(Substrate specificity) 13
8) 반응속도론(Kinetics) 14
9) 바이오디젤 생산과 적용 연구 14
Ⅲ. 결과 및 고찰 15
1. Streptomyces sp. CS326 균주의 동정 15
1) 분자생물학적 특성 분석 15
2. 지질분해효소의 생산성 향상을 위한 배지 성분의 최 적화 15
1) 탄소원이 지질분해효소의 생산에 미치는 영향 15
2) 질소원이 지질분해효소의 생산에 미치는 영향 16
3) 금속원이 지질분해효소의 생산에 미치는 영향 16
3. 지질분해효소의 생산 16
4. Streptomyces sp. CS326이 생산하는 지질분해효소 의 분리 및 정제 16
5. 겔 전기영동 17
6. 지질분해효소의 활성도와 안정성에 대한 pH와 온도 의 영향 17
7. 지질분해효소의 활성도에 대한 계면활성제의 영향 18
8. 지질분해효소의 활성도에 대한 금속이온과 조절인자 의 영향 18
9. 지질분해효소의 활성도와 안정성에 대한 유기용매의 영향 18
10. 지질분해효소의 기질 특이성 19
11. 지질분해효소의 반응속도론 19
12. N-말단 아미노산 서열 19
13. 지질분해효소를 이용한 바이오디젤 생산 및 연구 19
Ⅳ. 결론 21
Ⅴ. 참고문헌 37
- Degree
- Master
- Publisher
- 조선대학교 대학원
- Citation
- 박다정. (2011). Streptomyces sp. CS326 균주가 생산하는 지질분해효소의 정제 및 특성 분석.
- Type
- Dissertation
- URI
- https://oak.chosun.ac.kr/handle/2020.oak/9276
http://chosun.dcollection.net/common/orgView/200000256598
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Appears in Collections:
- General Graduate School > 3. Theses(Master)
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- Embargo2012-02-02
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