TAT-Hsp27이 MDPC-23 상아모세포주의 부착과 이주에 미치는 효과

Abstract

국문초록 TAT-Hsp27이 MDPC-23 상아모세포주의 부착과 이주에 미치는 효과 조선대학교 대학원 치의학과 임 영 신

상아모세포는 상아질 형성 뿐 아니라 치아의 치유와 재생에도 관여를 한다. 세포 부착과 이주는 조직 재생에 있어서 중요한 과정이다. 본 연구에서는 TAT-fusion protein system을 이용해 세포 내부로 Hsp27을 전달하는 것이 쥐의 MDPC-23 상아모세포주의 부착과 이주를 향상시키는 지를 알아보고자 하였다. 실험방법으로는 TAT-fusion 단백질을 분리하였으며, TAT-Hsp27 융합 단백질을 형질도입하고 탐지하였다. 또한 MTT 분석을 이용해 세포 생존력을 평가하였으며 Microplate Autoreader ELISA와 현미경을 이용해 세포 부착을 관찰하였고 CHEMICON을 이용해 세포 이주 능력을 평가하였다. 마지막으로 Western blot 분석과 국소적 부착도 평가하였다. 실험결과 TAT-fusion protein system은 성공적으로 세포내부에 Hsp27을 전달하였으며 TAT-Hsp27의 형질도입은 용량에 의존하여 MDPC-23의 부착과 이주를 유도하였다. 게다가 TAT-Hsp27의 형질도입은 β1 integrin의 단백질 발현과 국소적 부착 형성을 증가시켰으며 FAK와 ERK의 인산화를 유도하였다. MDPC-23 상아모세포주의 TAT-Hsp27-induced migration은 항β1 integrin 항체 처치에 의해 회복되었다. 결론적으로 TAT-Hsp27이 β1 integrin-mediated signaling을 통해 상아모세포양 세포의 부착과 이주를 촉진함을 알 수 있었으며 치아 재생을 위한 치료에 적용해 보는 것을 고려해볼 수 있었다.

Key words: 상아모세포, 부착, 이주, TAT-Hsp27, β1 integrin|ABSTRACT

Effect of TAT-Hsp27 on Adhesion and Migration of Odontoblastic MDPC-23 Cells

Lim, Young-Shin, D.D.S., M.S.D. Advisor : Prof. Hwang, Ho-Keel, D.D.S., M.S.D., Ph.D. Department of Dentistry, Graduate School, Chosun University

Odontoblasts are involved in tooth repair and regeneration as well as dentine formation. Cell adhesion and migration is a critical process for tissue regeneration. In this study, we examined whether delivery of Hsp27 into the cells using a TAT-fusion protein system enhances adhesion and migration of murine odontoblast-like cells, MDPC-23 cells. TAT-fusion protein system delivered successfully Hsp27 into the cells. Transduction of TAT-Hsp27 induced adhesion and migration of MDPC-23 cells in a dose-dependent manner. In addition, transduction of TAT-Hsp27 increased the protein expression of β1 integrin and focal adhesion formation, and induced the phosphorylation of FAK and ERK. TAT-Hsp27-induced migration of MDPC-23 cells was restored by treatment of anti β1 integrin antibody. These findings suggest that TAT-Hsp27 may promote adhesion and migration of odontoblast-like cells via β1 integrin-mediated signaling and can be considered as a candidate of therapeutic application for tooth regeneration.

Key words: Odontoblast, adhesion, migration, TAT-Hsp27, β1 integrin