PAMAM 덴드리머 유도체를 이용한 항생제 metronidazole의 국소방출 및 세포 내 antisense oligonucleotide의 전달 연구

Abstract

ANTISENSE OLIGONUCLEOTIDE 의 세포전달과 국소적 METRONIDAZOLE 방출을 위해 변형된 POLY(AMIDOAMINE) DENDRIMER 의 적용

덩휴트란 조선대학교 대학원 치의공학과 지도교수:유훈

본 연구에서는 antisense oligonucleotide의 세포내전달과 국부적 metromidazole 방출에 관한 조사를 위해 PAMAM dendrimer G5-pluronic F127과 PAMAM dendrimer G5-cholesteryl conjugates를 합성했다. 준비된dendrimer conjugat의 구조와 생물리적 특징은 FT-IR, ¹H-NMR, fluorescamine assay, capillary zone electrophoresis analysis, zeta potential 측정, 입자의 크기 측정 등의 방법들을 이용하여 조사하였다. Metronidazole의 방출에 관한 연구를 위해 다양한 농도의 metronidazole hydrochloride를 dendrimer G5-pluronic F127 conjugate 필름 (1/10, 1/20, 1/30의 몰농도)들에 각각 처리한 후 젤라틴 코팅의 처리 유무의 경우에 대해서 비교하였다. Dendrimer G5-pluronic F127 conjugate 필름의 표면은 독특한 형태로 관찰되었고, polymer erosion은 낮게 나타났으며, metronidazole 방출 시간은 코팅 처리 후 더욱 길었다. 10 % metronidazole hydrochloride로 처리한 1/30 mole 농도의 conjugate film에서 국소적 약물방출이 가장 적합하게 이루어졌으며, conjugate film에서 이루어진 약물의 방출은 pH, 타액, 습도에 의해 영향을 받았다. 약물의 방출은 산성 pH에서 유지되었고 타액 배지조건에서 polymer erosion은 더 느려졌다. 1/30 mole 농도의 conjugate film은 건조한 상태에서 9개월 동안 안정된 상태를 유지하였으며30 % 습도로 실온에서 보관시 polymeric erosion과 약물방출은 큰 영향을 받지 않았다. 또한 20 % 젤라틴으로 코팅된 1/30 mole 농도의 G5-F127 conjugate 필름은 지속적인 약물방출에 가장 적합한 것으로 평가되었다. Antisense oligonucleotide의 세포전달 연구를 위해 dendrimer G5-cholesterol conjugates에 대해 세포로의 전달 유효성을 splicing correction assay를 이용하여 합성되었다. Dendrimer-cholesteryl conjugate는 (1:5 mole ratio) antisense oligonucleotide와 생물학적 활성복합체를 합성하여 Hela 세포내로 antisense oligonucleotide전달을 중재하였다.