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수용성β-1,3-glucan 생산을 위한 β-1,3-glucan synthase 클로닝 및 재조합 대장균 개발

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Author(s)
윤춘희
Issued Date
2006
Abstract
The water-soluble β-1,3-glucan is produced by recombinant E.coli in fermentation reactor. Following β-1,3-glucan synthesis metabolic pathway, UDP-glucose is the exclusive precursor for the synthesis of β-1,3-glucan. But UDP-glucose on as much as β-1,3-glucan production outsides the conversion is possible even with the UDP-galactose. When the UDP-glucose increases conversions with β-1,3-glucan, it is that β-1,3-glucan synthase do to be revelation plentifully. In this study, for increase UDP-glucose to β-1,3-glucan reaction, we developed recombinant E.coli contain β-1,3-glucan synthase gene site. For a develop recombinant E.coli , From the Data Base of the NCBI the Putative of Agrobacterium sp.ATCC31749 β-1,3-glucan synthase catalytic subunit (gi:40556679) it used gene site.
Finally, the PCR reaction it amplified the DNA fragment and using electrophoresis confirmed DNA fragment size. That purified protein have mass of 72kDa, 62KDa, 42KDa, 31KDa on SDS-PAGE respectively.
Alternative Title
Construction of soluble glucan producing Escherichia coli by cloning β-1,3-glucan synthase from Agrobacterium sp. ATCC31750
Alternative Author(s)
Yin, Chun-Ji
Affiliation
조선대학교 대학원
Department
일반대학원 화학공학과
Advisor
이중헌
Awarded Date
2006-08
Table Of Contents
LIST OF TABLES = Ⅵ
LIST OF FIGURES = Ⅶ
ABSTRACT = Ⅷ
제1장 = 1
제2장 실험재료 및 방법 = 7
제1절 실험재료 = 7
제2절 수용성 β-1,3-glucan 생산을 위한 재조합 대장균주 개발 = 9
2-1 균주보관 및 플라스크 배양 배지조성 = 9
2-2 재조합 대장균주 개발 = 10
2-2-1 Genomic DNA Polymerase Chain Reaction = 13
2-2-2 Conjugation with T-easy vector = 15
2-2-3 Enzyme reaction = 15
2-2-4 Conjugation with expression vector = 15
2-2-5 Transformation to Escherichia coli Strain BL21(DE3) = 16
제3절β-1,3-glucan synthase의 발현확인 = 22
제4절 회분식 발효공정실험을 이용한 수용성 β-1,3-glucan 생산 = 24
4-1 시약 및 기기 = 24
4-2 균주 및 보관 = 24
4-3 배지조성 = 25
4-4 배양방법 = 25
4-5 균체량, glucose 및 수용성β-1,3-glucan 농도측정 = 25
4-6 NMR 분석을 이용한 수용성β-1,3-glucan 구조분석 = 28
제3장 결과 및 고찰 = 28
제1절 PCR을 이용한 DNA 증폭 = 28
제2절 재조합 균주 개발 = 31
제3절 SDS-PAGE실험을 이용한 단백질 발현확인 = 31
제4절 회분식발효를 이용한 수용성 β-1,3-glucan의 생산 = 35
4-1 재조합 대장균주Crds-F와CC-term의 회분식발효를 이용한 수용성 β-1,3-glucan 생산성 확인 = 38
4-2 재조합 대장균주CC-term와Crds-C의 회분식발효를 이용한 수용성 β-1,3-glucan 생산성 확인 = 41
제4장 결론 = 44
참고문헌 = 47
Degree
Master
Publisher
조선대학교 대학원
Citation
윤춘희. (2006). 수용성β-1,3-glucan 생산을 위한 β-1,3-glucan synthase 클로닝 및 재조합 대장균 개발.
Type
Dissertation
URI
https://oak.chosun.ac.kr/handle/2020.oak/6382
http://chosun.dcollection.net/common/orgView/200000232985
Appears in Collections:
General Graduate School > 3. Theses(Master)
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  • Embargo2008-07-16
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