Nitric oxide-mediated repression of amino acids metabolism Salmonella Typhimurium in
- Issued Date
- 2016
- Abstract
- 산화질소는 다양한 박테리아의 분자에 영향을 주어 비정상적인 대사와 성장을 보여준다. 하지만 박테리아 에서의 산화질소 타겟과 산화스트레스로부터 피하기 위한 전략은 아직 알려지지 않았다. 이전 논문에서 우리는 살모넬라균의 hmp 돌연변이균주에서 산화질소는 아미노산 영양요구성을 나타내고 박테리아 내부로 유입된 산화질소를 거의 대사할 수 있음을 보여주었다. 이 논문에서는 외부에서 첨가하는 glutamine과 glutamate가 산화질소가 노출된 배지에서 자라는 살모넬라의 hmp 돌연변이 균주의 성장을 최대로 성장시킴을 확인하였다. Gln과 Glu의 생합성은 밀접한 관련이 있기 때문에 우리는 Gln과 Glu 생합성에 관련되어 있는 유전자를 결핍시킨 hmp 돌연변이 균주의 성장을 통해서 Gln이 그 들의 성장에 필요함을 확인하였다. 오직 L-Gln만이 박테리아 성장을 회복시켰는데 이 결과는 박테리아 세포벽 합성과 성장회복과는 관계가 적음을 보여준다. 야생형균주와 hmp 돌연변이 균주의 산화질소 소비율에서 Gln의 첨가는 영향을 주지 않았는데 이 결과는 Gln에 의한 산화질소 저항성은 산화질소 대사와는 독립적으로 이루어짐을 알 수 있다. 이 결과들로 세포독성의 산화질소는 살모넬라의 Gln 레벨유지를 손상시켜, 그 결과로 Gln의 영양요구성을 가져올 수 있으나 주변의 Gln을 흡수함으로써 회복될 수 있을 것이라 여겨진다.
- Alternative Title
- 산화질소에 의한 살모넬라 아미노산 대사의 억제
- Alternative Author(s)
- park yoon mee
- Department
- 일반대학원 치의생명공학과
- Advisor
- 방일수
- Awarded Date
- 2016-08
- Table Of Contents
- CONTENS
Chapter I.
General abstract (in English) ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 2
General introduction ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 5
General introduction reference ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 12
Chapter Ⅱ.
Nitrosative stress causes amino acid auxotrophy in hmp mutant Salmonella Typhimurium
Abstract (in Korean) ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 18
A. Introduction ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 19
B. Materials and Methods ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 21
1. Bacterial strains and culture media ⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 21
2. Measurement of Salmonella susceptibility to
nitrosative stress ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 21
C. Results ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 23
1. Amino acid supplementation restores growth of hmp mutant under nitrosative stress ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 23
2. Cys and BCAA are required for NO resistance ⋯⋯ 28
D. Discussion ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 31
E. References ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 34
Abstract (in English) ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 38
Chapter Ⅲ.
Branched‑chain amino acid supplementation promotes aerobic growth of Salmonella Typhimurium under nitrosative stress conditions
Abstract (in Korean) ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 40
A. Introduction ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 42
B. Materials and Methods ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 47
1. Bacterial strains and culture media ⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 47
2. Measurement of Salmonella susceptibility to
nitrosative stress ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 50
3. Measurement of the Salmonella NO consumption
rate ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 51
4. Measurement of intramacrophage survival of Salmonella strains ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 51
5. Measurement of nitrite concentration ⋯⋯⋯⋯⋯ 52
C. Results ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 54
1. BCAA supplementation recovers aerobic growth of hmp mutant S. Typhimurium in NO‑producing cultures ⋯⋯⋯⋯ 54
2. BCAA supplementation does not change the NO‑metabolizing activity of S. Typhimurium ⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 61
3. ilvD mutant S. Typhimurium in RAW 264.7 macrophages is auxotrophic for BCAA ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 63
4. BCAA supplementation cause little effect on the replication of hmp mutant S. Typhimurium in NO‑producing RAW 264.7 macrophages ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 67
D. Discussion ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 70
E. References ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 76
Abstract (in English) ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 83
Chapter Ⅳ.
Nitric oxide represses the transcription of the glutamine synthetase gene glnA, which causes glutamine auxotrophy in Salmonella Typhimurium
Abstract (in Korean) ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 86
A. Introduction ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 88
B. Materials and Methods ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 90
1. Bacteria strains and growth conditions and chemicals⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 90
2. Construction of the S. Typhimurium ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 94
3. Disk diffusion assay ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 94
4. Measurement of NO consumption rate ⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 95
5. Measurement of Growth Kinetics ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 95
6. quantification of glutamine associated genes transcription by real-time reverse transcription (RT-PCR) ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 96
7. beta-galactosidase assay (β-gal assay)⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 97
C. Results ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 98
1. Supplementation with Gln or Glu recovers the growth of hmp mutant S. Typhimurium in NO-producing cultures ⋯⋯ 98
2. Conversion of Glu to Gln is required for Salmonella growth in NO-producing cultures ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 104
3. Gln supplementation does not change the NO consumption rate of S. Typhimurium ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 111
4. glnA transcription is repressed under nitrosative conditions in an NRI/NRII-dependent manner ⋯⋯⋯⋯⋯ 113
D. Discussion ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 117
E. References ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 123
Abstract (in English) ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯128
Chapter Ⅳ.
General conclusion⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 131
General abstract (in Korean) ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 134
- Degree
- Doctor
- Publisher
- 조선대학교
- Citation
- 박윤미. (2016). Nitric oxide-mediated repression of amino acids metabolism Salmonella Typhimurium in.
- Type
- Dissertation
- URI
- https://oak.chosun.ac.kr/handle/2020.oak/12855
http://chosun.dcollection.net/common/orgView/200000265612
- Appears in Collections:
- General Graduate School > 4. Theses(Ph.D)
- Files in This Item:
-
-
Download
Nitric oxide-mediated repression of amino acids metabolism Salmonella Typhimurium in.pdf
기타 데이터 / 3.12 MB / Adobe PDF
-
Items in Repository are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.