The role of NBS1 in normal cell cycle progression during mitosis

Abstract

To genome maintaining, DNA damage checkpoint and spindle assembly checkpoint plays an important role in mammalian cells. Cell cycle Checkpoint protein can control response to malignant cancers. Recent studies report that DNA damage checkpoint proteins are related to spindle assembly checkpoint. The NBS1 protein is essential to DNA damage response that maintains genome integrity to prevent cancer and developmental disorders. We find that NBS1 in-teraction with SPAG5 identified by yeast two-hybrid. The SPAG5 is required to regulation of mitosis spindle. We examined immunofluorescence microscopy, NBS1 foci is correctly located in centrosome in mitosis. Depletion of NBS1 in mammalian cells cause multi-spindle pole with a delay in mitotic progression. These finding demonstrate that Independent of DNA damage response, the NBS1 play a vital role in mitosis progression.|정상적인 세포주기의 진행을 위해 활성화되는 DNA 손상 반응 체크포인트와 세포분열 체크포인트는 세포의 유전체 안정성 유지에 중요한 역할을 수행한다. 최근 몇몇 연구들은 이 두 체크포인트간의 상호연관성을 증명하였다. DNA 손상반응 단백질 중 하나인 NBS1은 DNA 손상에 의해 유도되는 복구 경로에 중요한 역할을 수행하는 단백질로 알려져 왔다. NBS1은 이런 DNA 손상 복구 경로와 세포주기 검사점의 활성화에 관여하는 중요한 단백질로써 알려져 있다. 본 연구는 yeast-two hybrid screening을 통해 NBS1과 결합하는 SPAG5단백질을 동정하였다. SPAG5은 유사분열의 진행에서 염색체의 온전한 상태를 위해 자매염색분체 결합과 차후 염색분체 분리에 중요한 역할을 수행한다고 밝혀져 있다. 따라서 우리는 NBS1이 SPAG5과의 결합을 통해 유사분열의 진행에 관여하는 기전을 밝히고자 한다. NBS1이 유사분열의 진행에 미치는 영향을 확인하기 위해 세포 내 NBS1의 결핍을 통해 NBS1의 기능을 Western blot과 immunostaining을 통해 조사한 결과 염색체가 방추사의 적도판에 일렬로 배열되지 못하였으며 두 개 이상의 중심체를 형성함으로써 유사분열의 진행을 지연시킴을 확인하였다. 연구결과에 따라 NBS1은 DNA 손상 복구뿐만 아니라 유사분열 진행에도 관여하는 중요한 단백질임을 시사한다.