The study of the microRNA –induced cellular senescence
- Issued Date
- 2014
- Abstract
- DNA 손상은 유전자 불안전성을 유발하여 노화를 촉진하고 암을 유발한다. 특히 나이가 들면서 증가하는 암, 관절염, 치매 등은 유전자 손상과 밀접한 연관이 있는데, 아직까지 노화 과정에서 발생하는 유전자 불안전성의 원인에 대해서는 잘 알려져 있지 않다. 본 연구에서는 노화 과정 중에 miR-22 가 증가하고 증가된 miR-22 가 유전자 안정성을 유지하는 MDC1 단백질의 발현을 억제하여 노화된 세포에서 유전자 불안전성이 증가 사실을 규명하였다. 또한 나이가든 사람과 노화된 쥐의 장에서 miR-22 발현이 중가하고 MDC1 발현이 감소됨을 증명하였으며, 사람 혈액에서 노화가 진행도리 수록 MDC1의 발현이 감소되어 유전자 손상이 증가됨을 규명하였다. 따라서 miR-22는 노인성질환의 예방과 치료에 중요한 타깃으로 향 후 노인성질환 치료제 개발에 기여 할 수 있을 것으로 판단된다.
- Alternative Title
- microRNA에 의한 노인성질환 유발 연구
- Alternative Author(s)
- Kim ok hyeun
- Department
- 일반대학원 의학과
- Advisor
- 유호진
- Awarded Date
- 2014-08
- Table Of Contents
- KOREAN ABSTRACT……………………………………………………………vi
INTRODUCTION……………………………………………………………………1
MATERIALS AND METHODS
1. Cell cultures and treatment ……………………………………………………………5
2. miRNA and plasmid transfection………………………………………………………6
3. Antibodies…………………………………………………………………………………7
4. Western blot analysis……………………………………………………………………8
5. Immunofluorescence microscopy ……………………………………………………10
6. RNA extraction and Quantitative real-time PCR (qRT-PCR) …………………11
7. . Luciferase assay………………………………………………………………………13
8. Extraction of RNA and protein from mouse tissues………………………………14
9. Immunohistochemistry…………………………………………………………………14
10. Chromosomal aberration analysis ………………………………………………16
11. DR-GFP assay (HR assay) ………………………………………………………17
12. SA--gal (Senescence Associated-galactosidase) assay …………………17
13. Single cell gel electrophoresis (Comet) assay …………………………………18
14. Clonogenic survival assay …………………………………………………………19
15. BrdU incorporation assay …………………………………………………………20
16. Isolation of mononuclear cells from human blood………………………………21
17. CGH array and data analysis………………………………………………………22
18. Statistical analysis …………………………………………………………………23
RESULTS
1. MDC1 expression is post-transcriptionally regulated by miR-22…………24
2. miR-22 affects DDR function of MDC1 and induces genomic instability …27
3. Akt1 up-regulates endogenous miR-22 and inhibits homologous recombination ………………………………………………………………………………………30
4. Cellular differentiation up-regulates endogenous miR-22 and suppresses DSB repair ………………………………………………………………………………33
5. Senescence-induced up-regulation of endogenous miR-22 affects DSB re-pair…………………………………………………………………………………………35
6. miR-22 expression induces a senescence-like phenotype in human cancer cells and leads to the accumulation of DNA damage ………………………………39
DISCUSSION
Discussion ……………………………………………………………………………66
ABSTRACT
Abstract …………………………………………………………………………………75
REFERENCES
References……………………………………………………………………………77
- Degree
- Doctor
- Publisher
- 조선대학교 대학원
- Citation
- 김옥현. (2014). The study of the microRNA –induced cellular senescence.
- Type
- Dissertation
- URI
- https://oak.chosun.ac.kr/handle/2020.oak/12232
http://chosun.dcollection.net/common/orgView/200000276209
- Appears in Collections:
- General Graduate School > 4. Theses(Ph.D)
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