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miR-22에 의한 DNA손상 복구 반응 조절 기전

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Author(s)
정서연
Issued Date
2013
Abstract
세포에 DNA 손상 자극 시 자동적으로 손상을 체크할 수 있는 시스템이 작동해 세포주기 휴지, 노화, 세포사멸과 같은 현상을 유도한다. MDC1은 이런 DNA 손상 반응의 중요 요소로써, DNA 손상 시 손상 복구와 세포주기 확인점을 활성화 할 수 있게 하는 유전자로 알려져 있다. MicroRNA 는 small non-coding RNA로 전사후의 표적 유전자의 표현을 negative하게 조절하는 역할을 한다. 우리는 miR-22의 타겟으로 MDC1을 동정하고, miR-22가 MDC1의 발현을 조절하여 DNA손상 복구를 조절함을 증명하였다. 또한, 세포 노화 시 miR-22가 증가된다는 기존의 보고를 토대로 우리는 노화세포에서 miR-22 발현이 증가되고, 이를 통해 MDC1 발현을 억제하고 DNA 손상 복구에도 결핍을 초래하는 것을 확인 할 수 있었다. ASO-miR22 또는 MDC1을 과발현 시켰을 때 MDC1 발현, MDC1 foci, DNA손상 복구가 회복됨을 확인하였다. 따라서 본 연구는 노화 시 DNA 손상 복구의 결핍이 miR-22에 의해 MDC1 기능억제에 의함을 증명한 중요한 연구라 사료된다.|DNA damage responses have been well characterized with regard to their cell-autonomous checkpoint functions leading to cell cycle arrest, senescence and apoptosis. Mediator DNA damage checkpoint protein 1(MDC1) plays check-point activation and DNA repair following DNA damage. MicroRNAs are small non-coding RNA molecules that negatively control the expression of target genes post-transcriptionally. Here we report that MDC1 was identified as one of the targets of miR-22. miR-22 controls DNA damage repair through regulation of MDC1 expression. Previous studies have shown that miR-22 expression in-creases in senescent cells. Increase of miR-22 expression in senescent cells exhibits suppression of MDC1 expression and defective DNA repair. ASO-miR22 or MDC1 overexpression causes rescue the MDC1 expression, MDC1 foci recruitment and DNA repairs. Taken together, this study defines a critical role for miR-22 in the senescence-related of DSB repair through targeting MDC1.
Alternative Title
miR-22 regulates DNA double-strand break repair through silencing of MDC1
Alternative Author(s)
Jeong Seo Yeon
Department
일반대학원 생물신소재학과
Advisor
이정희
Awarded Date
2014-02
Table Of Contents
KOREAN ABSTRACT……………………………………………………………ⅳ
INTRODUCTION……………………………………………………………………1
MATERIALS AND METHODS
1. Cell culture……………………………………………………………………………5
2. RNA extraction and real-time qRT-PCR………………………………………5
3. Western blot………………………………………………………………………… 6
4. Firefly Luciferase Constructs and Luciferase Activity Assay……………7
5. comet assay…………………………………………………………………………8
6. Immunofluorescence microscopy………………………………………………9
7. Senescence-associated β-galactosidase staining…………………………10
RESULTS
1. miR-22 targets MDC1 ……………………………………………………………12
2. miR-22 mediated downregulation of MDC1 suppress DSB repair in
senescence cells…………………………………………………………………………16
DISCUSSION
Discussion ……………………………………………………………………………38
ABSTRACT
Abstract …………………………………………………………………………………40
REFERENCES
References……………………………………………………………………………42
Degree
Master
Publisher
조선대학교
Citation
정서연. (2013). miR-22에 의한 DNA손상 복구 반응 조절 기전.
Type
Dissertation
URI
https://oak.chosun.ac.kr/handle/2020.oak/11865
http://chosun.dcollection.net/common/orgView/200000264160
Appears in Collections:
General Graduate School > 3. Theses(Master)
Authorize & License
  • AuthorizeOpen
  • Embargo2014-02-26
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