CHOSUN

천마추출물이 인체 피부암 세포주에 미치는 영향

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Author(s)
이기복
Issued Date
2011
Abstract
Ⅰ. 서 론

피부암(皮膚癌, skin cancer) 은 피부 악성 종양으로 대표적인 종류로는 기저세포암, 편평상피세포암, 흑색종이 있다.

일반적으로 자외선에 과다하게 노출되면 피부암이 걸릴 확률이 높아진다. 자외선은 파장에 따라 UV-B와 UV-C로 구분되는데, UV-B는 기저세포암과 편평상피세포암을 유발하는 것으로 알려져 있다. 이 두 종류는 전체 피부암의 80%를 차지한다. 보다 치명적인 UV-C는 대개 오존층에서 여과되어 지표까지 도달하는 일이 드물지만, 최근 오존층의 파괴로 인해 UV-C가 여과되지 못하고 지표까지 도달하는 경우가 늘고 있다. UV-C는 흑색종을 유발한다. 흑색종은 발생한 세포마다 멜라닌을 침착시키면서 확산되며 예후가 좋지 않다. 흑색종은 유럽계 백인 집단에서 발병율이 더 높게 나타난다. 한편, 할로겐등이나 형광등과 같은 조명기구도 UV-C를 방출하여 장기간 노출되면 흑색종이 발생할 수 있다.

피부암은 가장 흔히 발병하는 암이다. 피부암의 80%는 얼굴, 머리, 손목 등 태양광에 노출된 부위에서 일어난다. 2002년 미국의 질병 통계에는 백만명 이상의 피부암 환자가 기록되었다. 피부암 발병자 가운데 대부분은 기저세포암이나 편평상피세포암이며 이 암들은 비교적 치료가 잘 되는 편이다. 흑색종은 피부암 환자의 3%를 차지했는데, 흑색종 환자 가운데 사망률은 14%로 위험한 암에 속한다.

최근 들어 여러 가지 질환 특히 암 예방과 치료에 천연물이 많이 이용되고 있으며 많은 연구가 진행되고 있는바, 특히 천마에 관한 연구가 활발하여 다양한 임상실험 결과에서 여러 종류의 암을 상당량 억제하거나 파괴했음을 보이고 있다.

천마에 관한 많은 선행연구를 고찰해 보면, 암 세포의 사멸에 관한 다양한 연구가 진행되었음을 알 수 있었고, 항암 연구와 관련이 매우 깊은 항염증에 관한 다양한 선행연구가 있었음을 알 수 있었다.

하지만 이러한 선행연구에도 불구하고, 피부암에 대한 항암 작용을 나타내는 천마의 연구는 아직 확인 된바가 없어 천마에 대한 피부암에 대한 효과 검증의 필요성이 증대 되고 있다.

본 연구에서는 인체 피부암 세포주 (Human Cutaneous Cancer Cell Lines)에 천마 천연추출물 두 종류 (열수추출물 Hot-Water Extracts 와 메탄올추출물 Methanol Extracts을 처리하여 암 세포주 억제 효과와 암 표적인자 발현 억제능 (COX-2 or iNOS)을 확인하고자 한다.
ABSTRACT

Effects of Gastrodia elata Blume extracts
on human cutaneous cancer cells

Gi-bok Lee
Advisor: Prof. Moon, Kyung-Rye M.D., Ph.D
Department of Alternative Medicine
Graduate School of Health Science
Chosun University

Objective : This study aims to examine the effects of the anti-cancer activity of Gastrodia elata Blume extract on human cutaneous cancer cells.

Methods : MTS assay was used to detect the effects of Gastrodia elata Blume extracts on the viability of human cutaneous cancer cells. And Western Blotting was used to see the effects of Gastrodia elata Blume extracts on inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) expression.

Results : Methanol extracts of Gastrodia elata Blume reduced human cutaneous cancer cells depending on time and concentration. Also it reduced iNOS expression at the concentration of 200μg/ml.

MTS assay results,
1. Methanol extracts of Gastrodia elata Blume did not reduce human cutaneous cancer cells at any given time.
2. Methanol extracts of Gastrodia elata Blume did not reduce human cutaneous cancer cells at any concentration. Cell survival rate did not decrease at all with respect to time or concentration.

3. Hot water extracts of Gastrodia elata Blumedo did not reduce human cutaneous cancer cells at any given time.
4. Hot water extracts of Gastrodia elata Blumedo not reduced human cutaneous cancer cells at any concentration. Cell survival rate did not decrease at all with respect to time or concentration.

Western blot results
5. Methanol extracts of Gastrodia elata Blume dramatically reduced inducible Nitric Oxide Synthase (iNOS) expression by 95% at 200μg/ml.
6. Hot water extracts of Gastrodia elata Blumedo did not reduce
inducible Nitric Oxide Synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) expressions at various concentrations.

Conclusion : Methanol extracts of Gastrodia elata Blume did not significantly reduced the cell viability of human cutaneous cancer cell lines. However, they reduced expression of iNOS by 92% at the concentration level of 200 μg/ml. Hot water extracts of Gastrodia elata Blume did not reduce the expression of iNOS at any concentration.

The reslts of methanol extracts of Gastrodia elata Blume implied that the isolation and purification process could bring out more various clinical effects.

Key words: Gastrodia elata Blume, human cutaneous cancer, MTS, iNOS, COX-2
Alternative Title
Gastrodia elata Blume Human Cutaneous Cancer Cell Lines
Alternative Author(s)
Lee, Ki Bok
Affiliation
조선대학교 대학원
Department
보건대학원 대체의학과
Advisor
문경래
Awarded Date
2012. 2
Table Of Contents
목 차

도표 목차 ......................................... ⅱ
영문 초록 .................................,....... ⅲ

Ⅰ. 서 론 ...............................,.......... 1

Ⅱ. 재료 및 연구 방법 .......................................... 3
1. 실험을 위한 재료
2. 시 약
3. 세포 배양 및 화학적 처리
4. 시료 준비
5. MTS 분석
6. Western blot 분석
7. 통계 처리

Ⅲ. 결 과 ........................................ 8
1. 천마(Gastrodia elata Blume) 추출물이 인체 피부암 세포주 (Human Cutaneous Cancer Cell Lines)에 미치는 영향 (24시간 및 48시간, 메탄올 추출물에서 MTS assay에 의한 세포생존율)
2. 천마(Gastrodia elata Blume) 추출물이 인체 피부암 세포주 (Human Cutaneous Cancer Cell Lines)에 미치는 영향 (24시간 및 48시간, 열수 추출물에서 MTS assay에 의한 세포생존율)
3. 천마(Gastrodia elata Blume) 추출물이 인체 피부암 세포주 (Human Cutaneous Cancer Cell Lines)에 미치는 영향
(메탄올 추출물, Western Blotting, iNOS 및 COX-2 발현량)
4. 천마(Gastrodia elata Blume) 추출물이 인체 피부암 세포주 (Human Cutaneous Cancer Cell Lines)에 미치는 영향
(열수 추출물, Western Blotting, iNOS 및 COX-2 발현량)
Ⅳ. 고 찰 ...................................... 12
Ⅴ. 결 론 ...................................... 15
Ⅵ. 참 고 문 헌 ...................................... 17
도 표 목 차


도표 1. 천마(Gastrodia elata Blume) 추출물이 인체 피부암 세포주 (Human Cutaneous Cancer Cell Lines)에 미치는 영향 (메탄올 추출물에서 MTS assay에 의한 세포생존율) ...................................... 8

도표 2. 천마(Gastrodia elata Blume) 추출물이 인체 피부암 세포주 (Human Cutaneous Cancer Cell Lines)에 미치는 영향 (열수 추출물에서 MTS assay에 의한 세포생존율) .................................. 9

도표 3. 천마(Gastrodia elata Blume) 추출물이 인체 피부암 세포주 (Human Cutaneous Cancer Cell Lines)에 미치는 영향 (메탄올 추출물에서 Western blotting에 의한 iNOS와 COX-2 발현량 측정) ........................................ 10

도표 4. 천마(Gastrodia elata Blume) 추출물이 인체 피부암 세포주 (Human Cutaneous Cancer Cell Lines)에 미치는 영향 (열수 추출물에서 Western blotting에 의한 iNOS와 COX-2 발현량 측정) ........................................ 11
Degree
Master
Publisher
조선대학교 대학원
Citation
이기복. (2011). 천마추출물이 인체 피부암 세포주에 미치는 영향
Type
Dissertation
URI
https://oak.chosun.ac.kr/handle/2020.oak/2271
http://chosun.dcollection.net/common/orgView/200000256945
Appears in Collections:
Medicine & Parmacy > Theses(Master)(의학전문대학원/보건대학원/임상약학대학원)
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